【转帖】公子小丑鱼（Amphiprion ocellaris）胚胎发育的形态学...

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引  言
公子小丑，海葵鱼属(Amphiprion)，雀鲷科(Pomacentridae)，鲈形目（Perciformes）。分布于中国南海、菲律宾、西太平洋的礁岩海域。性成熟后雌鱼体形比雄鱼大。野生雌性成体体长10-12cm，人工水族缸养殖体长多不大于10cm。体色橘红，椭圆形，体侧有三条银白色环带，分别位于眼睛后、背鳍中央、尾柄处，其中背鳍中央的白带在体侧形成三角形，各鳍橘红色有黑色边缘，喜欢躲在海葵中。公子小丑鱼由于其鲜艳的色彩、漂亮的花纹及可爱的形象而深受水族爱好者的喜爱。从1997到2002，公子小丑鱼占据了世界观赏鱼类鱼类总出口量15.6%和欧洲国家进口份额的25%以上[1]。海水观赏鱼也占到美国渔业贸易出口总额的20%，价值约8.9亿美元（Johunstou）[2]。迪士尼动画大片《海底总动员》的热播更是让公子小丑鱼“尼莫”成为家喻户晓的明星，也使其销量增加了两倍。随着经济的飞速发展和人民对精神文化需求的提高，海水水族缸在2000年后开始在国内兴起并飞速发展，目前在国内大中城市，海水观赏鱼店如雨后春笋般出现。
     由于受人工繁殖技术和生产规模的局限，目前市场上销售的公子小丑鱼仍以捕捞野生自然群体为主，并多用氰化物等有毒化学品进行捕捞，采捕后由于氰化物的毒性和长途运输中的氨中毒，能够作为商品进入市场的不足20%[3]，而且氰化物还会伤害无法逃避的珊瑚等海洋生物，破坏珊瑚礁区的生态平衡，所以海水观赏鱼的大规模商业化人工繁育就变得势在必行。目前国内外已有不少学者对公子小丑鱼的生理生态、繁殖发育做了初步研究[4-7]，并成功进行了人工育苗和批量化生产，但规模仍较小，满足不了市场所需。
1. 小丑鱼分布和生活习性
小丑鱼是对雀鲷科海葵鱼亚科鱼类的俗称，是一种热带海洋鱼类。已知有28种，一种来自棘颊雀鲷属（Premnas），其余来自双锯鱼属（Amphiprion）。小丑鱼与海葵有着密不可分的共生关系，因此又称海葵鱼。带毒刺的海葵保护小丑鱼，小丑鱼则吃海葵消化后的残渣，形成一种互利共生的关系。
（1）形态特征：背棘(总数)，12 - 12；背的软条 (总数)，14 - 16；臀棘 2；臀鳍软条，14–15，稚鱼全体是黑色的；前额与上侧面上有白色的斑块；所有鳍的外缘都是黑色。成鱼的地理分布和颜色是可变的。见图1

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目  录
摘  要        I
ABSTACTS        III
引  言        1
1. 小丑鱼分布和生活习性        1
2. 交配产卵        3
3. 人工繁殖、胚胎发育和环境因子对仔幼鱼的影响        3
4.荧光定量方法        4
5.繁殖生产中存在的问题        5
第一章  公子小丑鱼养殖模式和人工繁殖        6
1 材料与方法        6
1.1亲鱼养殖模式        6
1.1.1 亲鱼养殖系统        6
1.1.2 亲鱼的来源        7
1.1.3 亲鱼的暂养        7
1.1.4 亲鱼的配对        7
1.1.5 亲鱼的培养        7
1.2幼体培育系统        7
1.3 培育用水        8
1.4 生物饵料培养        8
1.5 仔幼鱼对饵料的需求        8
2.1 亲鱼产卵        8
2.2  受精卵人工孵化        9
2.3 仔幼鱼的孵化率和成活率        10
3讨论        10
第二章 公子小丑鱼胚胎发育的形态学观察        13
1 材料与方法        13
1.1  实验用鱼和养殖管理        13
1.2  胚胎发育观察        13
2 结果与分析        14
2.1 卵裂前期        15
2.2 卵裂期（1h）        16
2.3 囊胚期（5h）        16
2.4 原肠期（10h）        16
2.5 神经胚期（20h）        20
2.6 体节期（22h）        20
2.7 翻转期（35h）        20
2.8 血管形成期（56h）        21
2.9 器官形成期（72h）        21
2.10 孵化期（199h）        21
3 讨论        22
3.1 胚胎发育过程        22
3.2 孵化时间        22
3.3 胚胎颜色的变化        23
第三章 盐度对公子小丑鱼幼鱼生长和生长激素及其受体mRNA水平的影响        24
1 材料与方法        24
1.1 实验材料        24
1.2 实验方法        24
1.2.1 生长、成活率、摄食实验        24
1.2.2 生长激素及其受体mRNA水平实验        25
1.2.2.1  总RNA的提取        25
1.2.2.2  反转录及引物设计        25
1.2.2.3  常规PCR        26
1.2.2.4  荧光定量PCR 扩增        26
1.3 数据分析        26
2 结果        27
2.1  不同盐度对公子小丑鱼幼鱼成活率的影响        27
2.2 不同盐度对公子小丑鱼幼鱼生长及摄食的影响        27
2.3 荧光定量PCR分析        31
2.4  公子小丑鱼生长激素及其受体mRNA基因与β-actin mRNA 基因的荧光定量PCR标准曲线        33
2.5各盐度组垂体GHmRNA相对表达量        35
3 讨论        36
3.1盐度变化对公子小丑鱼幼鱼存活与生长的影响        36
3.2 盐度变化对公子小丑鱼幼鱼生长激素及其受体mRNA水平的影响        36
小  结        38
参考文献        39
攻读硕士期间发表的论文        43
致  谢        44